产品货号:
JN5017
中文名称:
2×SYBR qPCR SuperMix Plus
英文名称:
2×BalbStart SYBR qPCR SuperMix Plus
产品规格:
5mL|25mL
发货周期:
1~3天
产品价格:
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本制品是采用SYBR Green I嵌合荧光法进行Real Time PCR的专用试剂。预混液中已经将DNA聚合酶、精心优化的反应Buffer、dNTPs、SYBR Green I等试剂预混在一起,是一种2×浓度的预混型试剂,进行实验时,PCR反应液的配制十分简单方便。
本制品使用新型抗体修饰的HotStart Taq DNA聚合酶,并结合精心优化的反应Buffer,从而有效抑制低温下的非特异性扩增,提高反应特异性和扩增效率,能够在更宽广的范围内进行准确定量。
- 高特异性:采用新型工艺制备抗体修饰的HotStart Taq DNA聚合酶,无需热启动即可进行PCR反应,大大提高PCR扩增的特异性。
- 高效:精心配制的RealTime PCR专用2×SuperMix,具有更高的扩增效率和扩增灵敏度。
- 快捷:PCR反应所必需试剂集于一管之中,数分钟即可完成反应体系配制。
组分 | 5mL | 25mL |
2×SYBR qPCR SuperMix Plus | 1mL×5 | 1mL×25 |
RNase-Free Water | 1mL×5 | 1mL×23 |
ROX I | 200μL | 1mL |
ROX II | 200μL | 1mL |
保存:-20℃避光储存。
如需在一段时间内经常取用,可在2~8℃条件下储存3个月。避免反复多次冻融。
纯度检测:所有组分经检测均无核酸内切酶残留、核酸外切酶残留、核酸残留。
- 使用:请上下颠倒轻轻混合均匀,避免起泡,并经轻微离心后使用。反应液的配制、分装请使用新的(无污染的)枪头、Microtube等,避免污染。建议反应体积为20~50μL。
- 引物设计:一般为了增加灵敏度及扩增效率且抑制非特异性反应,扩增目标序列越短越好。建议设计成200bp以下。
- 按下表加入各成分配制反应体系
成分 用量 2×SYBR qPCR SuperMix Plus 10μL 上游引物 0.2~1.0μM(终浓度) 下游引物 0.2~1.0μM(终浓度) 模板 1~2μL ROX(需根据机器型号选择) 0.4μL RNase-Free Water 至20μL - 常用PCR循环
两步法可获得高特异性,三步法可获得高扩增率,用户根据需求选择扩增程序。- 两步法扩增程序:
温度 时间 循环数 95℃ 1分钟 1 95℃ 20秒 35~45 60℃ 1分钟 - 三步法PCR扩增程序:
温度 时间 循环数 95℃ 1分钟 1 95℃ 20秒 35~45 50~60℃ 20秒 72℃ 30秒
- 两步法扩增程序:
附录1:根据使用PCR仪选择使用ROX
- ROX I校准的Real Time PCR仪有:
ABI 5700/7000/7300/7700/7900/7900 HT/7900 HT Fast;
ABI StepOne/StepOnePlus及其他仪器。 - 用ROX II校准的Real Time PCR仪有:
ABI 7500/7500 Fast;
ABI ViiA7;ABI Q5 Q6;
ABI Quant Studio 6/7 Flex;
Stratagene MX4000/MX3500P/MX3000P及其他仪器。 - 不需要用ROX校准的Real Time PCR仪有:
Bio-Rad CFX96/CFX 384/iCycler iQ5/iQ/My iQ5/MiniOpticon/Opticon/Opticon/Chromo4;
Eppendorf MasterCyclerrealplex/realplex 2s;
Cepheid SmartCycler;
Illumina Eco qPCR;
Roche Applied Science LightCycler 480;
Thermo Scientific PikoReal Cycler;
Qiagen/Corbett Rotor-Gene Q/Rotor-Gene 3000/RotorGene 6000及其他仪器。
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